A型流感病毒NP基因小干涉RNA表達(dá)載體的構(gòu)建

以A型流感病毒NP基因?yàn)榘袠?biāo)，設(shè)計(jì)并合成了3對(duì)編碼發(fā)夾狀siRNA寡聚核苷酸。將合成的序列互補(bǔ)的寡聚核苷酸退火形成雙鏈，克隆至pSilencer 1.0-U6載體中，并轉(zhuǎn)化DH5a菌株，氨芐抗性篩選陽(yáng)性菌落，擴(kuò)大培養(yǎng)后，提取質(zhì)粒進(jìn)行酶切鑒定，并進(jìn)行測(cè)序分析。結(jié)果顯示，酶切后得到預(yù)期長(zhǎng)度的DNA片段；插入序列插入的位置與設(shè)計(jì)完全一致，無(wú)堿基缺失或突變。表明A型流感病毒NP基因小干涉RNA表達(dá)載體構(gòu)建成功。